色谱柱,如何判断色谱柱的柱效如何判断色谱柱的柱效?

如何判断色谱柱的柱效如何判断色谱柱的柱效?

柱效简而言之就是色谱柱对色谱中两种物质分离能力的大小。柱效越高，分离效果越好，峰形越好，反之则分离效果差，峰形差，甚至不能完全分开两个物质。色谱柱的柱效和填料、柱长、柱内径均有关系，填料越细密、柱长径比越大，柱效越高。色谱柱的选择可根据待分析样品的极性、分子量大小、是否可溶于水等因素来考虑。如样品分子量大于2000的，可溶于水的，可选择凝胶色谱柱、大孔径反相色谱柱、大孔径离子交换色谱柱。分子量小于2000的，溶于有机相的，可选择正相模式色谱柱。根据经验公式，柱效由保留时间和半峰宽决定。同一条件比对，不同的柱子，保留时间越长，半峰宽越窄，柱效越高。柱效是色谱柱分离能力的度量。主要有操作参数和动力学因素决定。一般可通过测定色谱柱的塔板数、分离度等加以评价。塔板数可参考蒸馏塔的塔板理论，一塔板可理解为一次吸附解吸附的过程，分离度标志两峰分开的程度。不同的色谱柱有不同的测试方法，来自不同厂家的同类色谱柱也往往采用不同的测试条件，所以最好按照色谱柱说明书中的测试报告测定柱效。

那些HPLC色谱柱可以用纯水

一般不能。HPLC多用CC18色谱柱，而这些柱子要求最少也要有5%的有机相，用纯水相容易破坏固定性，从而使柱效下降。你问的应该是反相色谱柱，因为凝胶过滤用纯水相是司空见惯的。Agilent的Bonus系列，Aichorm的Aqua系列，都是可以做纯水相的。但你如果只是考虑梯度起点的高水相比例，那就不必了，普通的CC8都可以用纯水相短时间冲洗，不超过10个柱体积，是没什么问题的。看是什么柱子，有一些做糖的柱子就是要求纯水做流动相的。可以使用纯水作为流动相”意味着该色谱柱具有较好的耐水性，可以在流动相中使用纯水。这通常是一个优点，因为它增加了色谱柱的使用范围，并可以在某些应用中提高分离效果。使用纯水作为流动相可以降低实验成本。在一些实验中，为了避免有机溶剂的污染和挥发，会选择使用纯水作为流动相。相C18色谱柱（即憎水柱子）如果用纯水冲洗后，如果立即停泵则由于其憎水（疏水）的缘故使得柱子内的水因而流失掉，长时间停泵使得柱子干掉（变干），会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷（也说成是失去支撑倒下），柱子就这样报废了。

气相色谱安装色谱柱需要注意什么?

安装拆卸色谱柱必须在常温下。填充柱有卡套密封和垫片密封，卡套分三种，金属卡套，塑料卡套，石墨卡套，安装时不易拧的太紧。垫片式密封每次按装色谱柱都要换新的垫片（岛津色谱是垫片密封）。色谱柱两头是否用玻璃棉塞好。防止玻璃棉和填料被载气吹到检测器中。避免重复使用密封垫，每次更换新的密封垫。使用合适的工具（如陶瓷片或金刚石切割器）进行柱切割。在安装前确保色谱柱头清洁平整，并没有明显损坏或污渍。按照气相色谱仪厂家指示，在进样口和检测器之间设置正确距离并插入好色谱柱。第一个就是确定方向，新柱子没有方向，第一次用过之后色谱柱的方向就确定了，记得一定要标示清楚，以后用的时候都要按照同一个方向使用。第二个就是要老化。新柱子和很久不用的色谱柱都需要老化，温度是从常温按照5℃/min的速度逐渐上升，至比色谱柱最高耐受温度低20℃的温度就可以了。将色谱柱连接于进样口上色谱柱在进样口中插入深度根据所使用的GC仪器不同而定。正确合适的插入能最大可能地保证试验结果的重现性。通常来说，色谱柱的入口应保持在进样口的中下部，当进样针穿过隔垫完全插入进样口后如果针尖与色谱柱入口相差1-2cm，这就是较为理想的状态。

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