石蜡切片,石蜡切片的操作步骤包括哪些?

石蜡切片的操作步骤包括哪些?

包埋：将液态的石蜡倒入模具盒中，再将浸好蜡的组织块平放底部，注意切面方向朝下放置，待石蜡凝固后去掉包埋框，完全冷却变硬后再修整蜡块，组织外围的石蜡保留适中以便切片。：主要过程包括固定：目的是为防止组织细胞离体后细胞发生自溶，以保持形态结构的原有状态。常用的固定剂有甲醛、乙醇。包埋：目的是增强组织材料的硬度，便于切片。常用的包埋剂有石蜡、树脂等。HE染色过程是：①将已入蒸馏水后的切片放入苏木精水溶液中染色数分钟。②酸水及氨水中分色，各数秒钟。③流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻。④入70％和90％酒精中脱水各10分钟。⑤入酒精伊红染色液染色2—3分钟。流程：二甲苯与酒精的等体积混合液1h---纯二甲苯1h---纯二甲苯1h。浸蜡与包埋目的：用石蜡取代透明剂，使石蜡浸入组织而起支持作用。石蜡作为包埋剂，有其独特的优点，例如：石蜡能切出极薄的蜡片（2～10μm）；切片时能连成蜡带，便于制作连续切片；操作较容易，组织块可以包埋在石蜡中长期保存。

石蜡切片为什么要用二甲苯和酒精脱蜡?

为什么石蜡切片染色后还要用二甲苯处理最佳答案由提问者推荐匿名用户在光镜下可长期反复观察，在95%及纯酒精中的时间可适当加长以保证脱水彻底。染色石蜡包埋的组织切片必须经过脱蜡水洗处理才能染色，让水溶性染料渗入组织中，含蜡的组织切片无法进行任何染色。所以，在染色前必须用二甲苯或替换剂进行彻底脱蜡，经过乙醇洗后，再用水洗。会影响最后的结果。组织石蜡切片二甲苯脱蜡，梯度乙醇至氺。切片脱蜡必须干净，否则将会影响免疫组化染色的最后结果。失蜡法，又称脱蜡法，也称熔模法。是一种铸造方法。常用的透明剂有二甲苯，二甲苯是石蜡的溶剂。纯酒精不能与石蜡相溶，还需用能与酒精和石蜡相溶的溶剂，替换出组织内的酒精。材料块在透明剂浸渍过程称透明。由于要染色的切片尚包在石蜡而所用的染色液都为水溶液,因此在染色必须再度复水。与固定的组织块脱水、透明的步骤相反,石蜡切片先在二甲苯中溶去石蜡,再经过各级酒精,下行至水。脱水时是先用福尔马林固定了好几天，然后在70%、80%、96%酒精各90分钟；100%、100%酒精各60分钟；二甲苯和酒精混合液60分钟；二甲苯、二甲苯各4小时。第一个石蜡4个小时，第二个石蜡4个小时。

石蜡切片有空洞怎么办

有3种可能：材料脱水和透明时间过长，材料太脆了，一切就碎；材料本身太硬，刀片切几下就钝化了，再接着切出来的材料都会不完整；刀片不够锋利。重新固定。将切片放入固定液中，通常为醛类或乙醇，在室温下放置数分钟至数小时，使切片固定。烘烤。将切片放置在烘箱中，在50℃至60℃下烘烤约30分钟至1小时，使切片中的石蜡固化。冷冻。建议：取材要快，离体5分钟内修整好组织块，放入固定液，越快越好，减少组织自溶；组织固定时体积要小，不大于5mm；固定液充分，固定液与组织的体积比10-1。加强冷冻。注意刀口上是否留有一层石蜡，清扫刀片，刀片刮蜡，二甲苯擦拭刀口。刀口是否钝，换新刀口。如组织含脂肪多，前期脱脂处理，包埋挤压脂肪。有关石蜡切片机的信息，可以去瑞沃德生命科技网站了解更多。不易着色。石蜡切片没脱干净可能会导致切片不易着色和着色不匀的情况。在二甲苯脱蜡之前可以先在60℃烤箱内5~1小时，这样可以使切片粘附更牢固不易脱片，也有利于脱蜡。

石蜡切片的制作过程

将材料分别放入25%、50%、75%的石蜡-二甲苯溶液中，每级30分钟。该过程在高于石蜡熔点3℃的温箱中进行；将材料放入溶解的纯蜡中，时间为30分钟，该过程再重复两次。在高于石蜡熔点3℃的温箱中进行。浸蜡：浸蜡的全过程应在恒温设备中进行，将恒温箱调至58℃。二甲苯与石蜡混合液（→石蜡Ⅰ→石蜡Ⅱ浸蜡必须彻底，否则组织内残留透明剂会造成切片过程的困难和影响切片的质量。低温浸蜡（36℃）：接上步，在有二甲苯和材料的烧杯中逐步加碎蜡至过饱和（石蜡不能溶解），过夜12-24h。石蜡切片制作过程如下：切削很困难，而且无法得到十分菲薄的切片，因此必须先用某些特殊物质渗入组织块的内部起支持作用，并将整个组织块包住，然后再用精密的切片机制作切片，才能获得良好的效果。石蜡切片的制作过程的步骤包括：取材，固定，脱水，透明，透蜡，包埋，切片，贴片，染色，透明，封藏等具体是：取材材料的好坏直接影响到切片的质量，无论取哪一种动植物材料，以下几点是必须注意的。

石蜡切片制作常用包埋剂是

固定：目的是为防止组织细胞离体后细胞发生自溶，以保持形态结构的原有状态。常用的固定剂有甲醛、乙醇。包埋：目的是增强组织材料的硬度，便于切片。常用的包埋剂有石蜡、树脂等。这种方法称为包埋法，包埋的物质称为包埋剂。常用的包埋剂有石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等，水和塑料也可作为包埋剂。中包埋,而水和石蜡是不相溶的。必须经过脱水后,才能进入包埋阶段。常用的脱水剂有乙醇、丙酮、正丁醇等,最常用的还是乙醇。利用脱水剂吸水的特性,在各级浓度脱水剂中逐渐吸取组织中的水分。石蜡切片的最后一步就是封片我们做的步骤是用中性树胶封片封片的过程中最应该注意的就是中性树胶不要过多也不要过少，过多会溢出来，过少会出现空隙；详细的量就要自己经验掌握了。回不好意思,十几年前做过,早忘从网上下载了篇文章,感觉这篇文章挺详细,希望多你有帮助一材料的选择与分割选取新鲜、无病虫害并具代表性的材料先作徒手切片或剥离检查,决定适宜的材料,立即固定。

石蜡切片法一般常规切片厚度为

石蜡切片法一般常规切片厚度为4到6μm。切片厚度过厚，组织细胞重叠，不易观察。切片厚度过薄，细胞结构不清晰，易破碎。4~6μm的切片厚度既能保证组织细胞不重叠，又能清晰显示细胞结构，便于观察和诊断。这类切片法一般常规切片厚度为3-10微米。切取的组织块不宜太大，以利于固定剂穿透，通常以5mm×5mm×2mm或10mm×10mm×2mm为宜。切片太厚，细胞结构重叠，不易观察。切片太薄，容易碎裂。石蜡切片是一种常规切片技术，切片机多为旋转式，切片厚度2~7μm。石蜡切片法最大的优点是可以切(2~3微米)片，薄而均匀，无褶皱。石蜡切片具有良好的组织固定性，染色对于组织结构的保存具有优势。3-10微米。根据相关信息查询显示：通常情况下，石蜡切片的厚度一般为3-10微米，具体选择多厚的切片取决于实验目的和分析设备。根据查询不凡考网显示，石蜡切片的厚度要求在4到6微米之间。用于光镜观察的石蜡切片厚度一般是5～10μm。活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜下不易清楚区别出；组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败，失去原有正常结构。

本文旨在向您提供石蜡切片和石蜡切片的操作步骤包括哪些?方面的实用知识。如果你需要更多帮助，请随时联系我们。